一、光的基本知識
光是由光量子組成的，具有二重性，即不連續(xù)的微粒和連續(xù)的波動(dòng)性。波長和頻率是光的波動(dòng)性和特征，可用下式表示：
Ｃ
λ＝───
Ｖ
式中λ為波長，具有相同的振動(dòng)相位的相鄰兩點(diǎn)間的距離叫波長。Ｖ為頻率，即每秒鐘振動(dòng)次數(shù)。Ｃ為光速等于299770千米／秒。光屬于電磁波。自然界中存在各種不同波長的電磁波，列成表1-1所示的波譜圖。 分光光度法所使用的光譜范圍在200nm-10μ（1μ= 1, 000nm ）之間。其中200nm－400nm為紫外光區(qū)，400nm－760nm為可見光區(qū)，760nm－10,000nm為紅外光區(qū)。
二、朗伯－比爾（Lambert-Beer）定律
朗伯－比爾定律是比色分析的基本原理，這個(gè)定律是有色溶液對單色光的吸收程度與溶液及液層厚度間的定量關(guān)系。此定律是由朗伯定律和比爾定律歸納而得。
1.朗伯定律
一束單色光通過溶液后，由于溶液吸收了一部分光能，光的強(qiáng)度就要減弱：若溶液濃度不變，則溶液的厚度愈大（即光在溶液中所經(jīng)過的途徑愈長），光的強(qiáng)度減低也愈顯著。
2.朗伯－比爾定律
如果同時(shí)考慮吸收層的厚度和溶液濃度對光吸收的影響，則必然將朗伯定律和比爾定律合并起來，吸光度與溶液的濃度和液層的厚度的乘積成正比，這就是朗伯－比爾定律。