AMAMFSAc05022 奶油 巧克力 乳蛋白 凱氏定氮法
AM-AM-FS-Ac-05022
奶油巧克力中的乳蛋白
1 適用范圍
不適用于受到高熱處理的含乳蛋白的巧克力制品。
2.試驗過程
稱量10.0g細碎的奶油巧克力，加入250ml或再大些的離心瓶中，用約100ml乙醚萃取兩次，通過振蕩至均勻，離心后傾潷上層乙醚層。瓶子上塞上帶彎頭玻璃管和直玻璃管的兩孔塞，其中直管伸至距底部1/3處。將瓶子放在溫?zé)?(不是燙熱)的地方，同時通過彎管抽氣使瓶中吸入適度空氣流以排除乙醚。當(dāng)乙醚被排出后，移取100mlH2O加入到瓶中。塞住，充分振蕩4min，移入100ml 1%Na2C2O4溶液。塞住，充分振蕩3min，讓其靜置約10min，然后再振蕩1-2min。高速 (每分鐘約1800轉(zhuǎn))離心約15min。
傾潷上層清液于燒杯中。移取100ml清液到干燥的250ml燒杯中，并輕輕攪拌的同時加入1ml HOAC。讓其靜置幾分鐘后，沉淀可部分沉降，攪拌下加入4ml 10%的單寧酸溶液(溶液配制后不能超過1周)。讓其沉降幾分鐘；在7cm瓷漏斗上適度抽氣過濾。過濾液應(yīng)該是清晰的。用S&S589白色螺條濾紙(或同類濾紙)過濾，在濾紙上覆蓋一層紙漿。紙漿是由一條15cm長的Whatman1號濾紙撕碎與水一起搗制而成。在淀帚幫助下，用洗滌溶液(100ml 1% Na2C2O4溶液中加入1ml HOAc和2ml 10%單寧酸溶液)將所有的沉淀轉(zhuǎn)移到漏斗中。在過濾漏斗上洗1到2次。用刮勺松開漏斗周圍邊緣，小心卷起并移取濾紙和沉淀，放入長頸燒瓶中。用數(shù)片潮濕濾紙將粘附于漏斗或刮勺上的沉淀顆粒轉(zhuǎn)移到燒瓶中。按33-24C測定N。
N×2×6.38=用于分析的10g樣品中的酪蛋白和清蛋白總數(shù)。
酪蛋白和清蛋白×1.07=總的乳蛋白。
3.來源
AOAC 官方方法939.02第17版
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