這些細則要遵守

1.實驗室參加實驗的人員，必須整潔、文明、肅靜。

2.進入實驗室的所有人員必須遵守實驗室的規(guī)章制度，實驗室為無煙實驗室，嚴禁在實驗室內(nèi)吸煙，不得吃口香糖，不得隨地吐痰和亂扔紙張。

3.參加實驗的人員在實驗過程中，要注意保持室內(nèi)衛(wèi)生及良好的實驗秩序。實驗結(jié)束后，必須及時做好清潔整理工作，實驗人員必須將工作臺、儀器設(shè)備、器皿等清潔干凈，并將儀器設(shè)備和器皿按規(guī)定歸類放好，不能任意搬動和堆放。所有實驗所產(chǎn)生的廢物放入廢物箱內(nèi)，并及時處理，清理好現(xiàn)場。

4.在每次實驗結(jié)束后，實驗人員必須對實驗室進行清掃。

5.實驗室主任負責(zé)安排日常的衛(wèi)生清掃、儀器設(shè)備的維護保養(yǎng)工作。實驗室成員有參加本室清掃及維護保養(yǎng)儀器設(shè)備的義務(wù)。

6.實驗室內(nèi)各種設(shè)備、物品擺放要合理、整齊，與實驗無關(guān)的物品禁止存放在實驗室。

7.實驗室為保持室內(nèi)地面、實驗臺、設(shè)備和工作環(huán)境的干凈整潔，必須堅持每天一小掃，每周一大掃的衛(wèi)生制度，每年徹底清掃1~2次。

8.實驗室內(nèi)的儀器設(shè)備、各人實驗臺架、凳和各種設(shè)施擺放整齊，并經(jīng)常擦拭，保持無污漬、無灰塵。

9.衛(wèi)生責(zé)任人應(yīng)對實驗室桌面、地面及時打掃。注意保持室內(nèi)場地和儀器設(shè)備的整潔衛(wèi)生。

10.實驗室內(nèi)雜物要清理干凈，有機溶劑、腐蝕性液體的廢液必須盛于廢液桶內(nèi)，貼上標簽，統(tǒng)一回收處理。

11.保持室內(nèi)地面無灰塵、無積水、無紙屑等垃圾。

12.實驗室整體布局須合理有序，地面、門窗等管道線路和開關(guān)板上無積灰與蛛網(wǎng)。

13.下班前必須搞好清潔衛(wèi)生，關(guān)好門窗、水龍頭，斷開電源，清理場地。

14.不得將任何與實驗無關(guān)的物品帶入實驗室。

15.對于亂擺放的實驗藥品、儀器等，實驗室負責(zé)人有權(quán)沒收或當(dāng)做廢品處理，實驗工作人員不得有任何異議。

清洗實驗室器皿標準操作規(guī)程

目的：去除器皿上的殘余物，使器皿可重復(fù)使用。

范圍：化學(xué)試驗室樣品處理過程中使用的器具，如剪鉗、刀片、塑料籃、玻璃容器、陶瓷坩鍋、微波消解罐等。

樣品前處理的工具

1、用砂紙輕輕打磨掉金屬工具表面的銹漬，不要過度用力，以免磨掉保護涂層，然后，用脫脂棉蘸無水乙醇擦拭，至脫脂棉上看不到污漬為止。

2、剪鉗，刀片，研缽使用前必須用脫脂棉蘸無水乙醇擦拭接觸樣品部位2~3遍，脫脂棉上看不到污漬方可使用。

3、裝樣品的塑料籃每月至少用洗潔精清洗一次，如有明顯斑點、粉塵、則應(yīng)立即清洗。

4、樣品拆分臺面每天定時清理，所有工具應(yīng)整齊，按類別擺放，臺面用紙巾擦拭，應(yīng)無黑斑。

5、玻璃容器(燒杯，試管，漏斗，三角燒瓶，培養(yǎng)皿)、玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管)、新購置的玻璃器皿應(yīng)在硝酸(10%)溶液內(nèi)先浸泡6小時方可使用。

6、 應(yīng)把玻璃器皿內(nèi)的溶液倒入廢液桶，自來水沖洗一遍后，方可收集一起浸泡，以免交叉污染。

7、玻璃容器，玻璃量器盡可能分開用自來水浸泡，且讓水能完全進入器皿中，不應(yīng)留有氣泡。

8、燒杯，試管，漏斗，三角燒瓶，培養(yǎng)皿等可用瓶刷沾上洗衣粉或洗潔精刷洗，然后用自來水充分沖洗干凈。玻璃量器不可刷洗。

9、玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管)應(yīng)用上洗衣粉或洗潔精涮洗，最好用熱水(60~70℃)。

10、玻璃器皿經(jīng)洗滌后，若內(nèi)壁的水是均勻分布成一薄層，表示油垢完全洗凈，若掛有水珠，則還需用洗滌液浸泡數(shù)小時，然后再用自來水充分沖洗。

洗滌液的配制與使用

洗滌液的配制洗滌液分濃溶液與稀溶液兩種，配方如下： 

①濃溶液：

重鉻酸鈉或重鉻酸鉀（分析純）50g 
自來水 150mL 
濃硫酸（分析純） 800mL 

②稀溶液：

重鉻酸鈉或重鉻酸鉀（分析純） 50g 
自來水 850mL
濃硫酸（分析純） 100mL

配法都是將重鉻酸鈉或重鉻酸鉀先溶解于自來水中，可慢慢加溫，使溶解，冷卻后徐徐加入濃硫酸，邊加邊攪動。配好后的洗滌液應(yīng)是棕紅色或桔紅色。貯存于有蓋容器內(nèi)。

帶好長橡膠手套，除去器皿內(nèi)的水，慢慢倒入洗滌液，轉(zhuǎn)動器皿，使洗液充分浸潤不干凈的器壁，數(shù)分鐘后把洗液倒回洗液瓶中，用自來水沖洗器皿。若器壁上粘有少量殘渣，可先將洗滌液加熱,加入少量洗液浸泡殘渣。

注意: 本操作有危險性!

1.洗滌液中的硫酸具有強腐蝕作用，千萬別忘記將器皿取出沖洗；洗滌液若沾污衣服和皮膚應(yīng)立即用水洗，再用蘇打水或氨液洗；如果濺在桌椅上，應(yīng)立即用水洗去或濕布抹去；

2.玻璃器皿投入前，應(yīng)盡量干燥，避免洗滌液稀釋；

3.此液的使用僅限于玻璃和瓷質(zhì)器皿，不適用于金屬和塑料器皿；

4.有大量有機質(zhì)的器皿應(yīng)先行擦洗，然后再用洗滌液，這是因為有機質(zhì)過多，會加快洗滌液失效。此外，洗滌液雖為很強的去污劑，但也不是所有的污跡都可清除；

5.盛洗滌液的容器應(yīng)始終加蓋，以防氧化變質(zhì)；

6.洗滌液可反復(fù)使用，但當(dāng)其變?yōu)槟�綠色時即已失效，不能再用。

經(jīng)洗滌過的玻璃容器倒置，至無水滴滴下用硝酸(10%)溶液浸泡至少12小時，用水涮洗后方可使用。浸泡溶液每星期檢測一次Pb Cr Cd Hg含量，超過1ppm則更換溶液。

玻璃量器(容量瓶，量筒，移液管) 用硝酸(30%)溶液浸泡至少12小時后，用DI水涮洗后，在無塵處倒置晾干水分，自然干燥。

玻璃容器(燒杯，試管，漏斗，三角燒瓶，培養(yǎng)皿) 放在電烘箱中烘干，烘箱溫度為105℃,保持通風(fēng)烘1~2h即可。

清洗好的玻璃儀器要分門別類地存放，以便取用。

1 塑料器皿

塑料漏斗參照玻璃漏斗清洗步驟，可與玻璃漏斗一同清洗。

聚四氟乙烯燒杯和微波消解罐須與玻璃器皿分開處理，先用自來水沖洗干凈后，再用配制好的酸液浸泡至少12h。

酸液配制方法：500mL硝酸+100mL冰乙酸，水定容于1000mL容量瓶。

酸液每半個月檢測一次Pb，超過5ppm則更換溶液

注意:勿用毛刷刷洗塑料器皿!

2 陶瓷坩鍋

可參照聚四氟乙烯燒杯和微波消解罐清洗方法。

若依然不能清洗干凈，將陶瓷坩鍋置于電熱板上加熱至無水份后，放入馬氟爐中，保持800℃烤2h，取出冷卻。

清洗好的陶瓷坩鍋內(nèi)壁應(yīng)潔白無深色斑點。

3 臨床基因擴增（PCR）檢驗實驗室規(guī)范

為避免污染，必須嚴格遵循《臨床基因擴增檢驗實驗室設(shè)置標準》設(shè)置臨床基因擴增檢驗實驗室。

4 試劑貯存和準備區(qū)

貯存試劑和用于標本制備的材料應(yīng)直接運送至試劑貯存和準備區(qū)，不能經(jīng)過產(chǎn)物分析區(qū)�！　�

含反應(yīng)混合液的離心管或試管在冰凍前都應(yīng)快速離心數(shù)秒�！　�

主反應(yīng)混合液的組成成份尤其是聚合酶的適用性和穩(wěn)定性通過預(yù)試驗來檢查，評價結(jié)果必須有書面報告。

在整個本區(qū)的實驗操作過程中，操作者必須戴手套，并經(jīng)常更換。

嚴禁用嘴吸取液體，加樣器和吸頭等必須經(jīng)高壓處理。
工作結(jié)束后必須立即對工作區(qū)進行清潔。

5 標本制備區(qū)

正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動�！　�

用過的加樣器吸頭必須放入專門的消毒容器內(nèi)。實驗室桌椅表面每次工作后都要清潔，實驗材料如出現(xiàn)外濺，分別處理并作記錄。
對實驗臺適當(dāng)?shù)淖贤庹丈?/span>(254nm波長，與工作臺面近距離)適合于滅活去污染�？梢苿幼贤饩�管燈可用來確保工作后對實驗臺面的充分照射。
樣本處理對核酸擴增有很大影響，必須使用有效的核酸提取方法，可在開展臨床標本檢測前對提取方法進行評價。
用于RNA擴增檢測的樣本制備好以后，應(yīng)立即進行cDNA合成，因為cDNA鏈較RNA穩(wěn)定，保存相對容易。為保證逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的需要，應(yīng)在標本制備區(qū)設(shè)置一個以上的溫育裝置。

6 cDNA合成的理想溫度依所使用的酶而定，傾向于使用一步法：

即使用在擴增反應(yīng)緩沖液條件下具有逆轉(zhuǎn)錄活性的熱穩(wěn)定的DNA聚合酶進行逆轉(zhuǎn)錄，其較cDNA合成后再開蓋以調(diào)節(jié)緩液或加入聚合酶進行擴增發(fā)生污染的可能性降低。
待測RNA的cDNA拷貝須保存在標本制備區(qū)，不得在本區(qū)對樣本進行PCR擴增。

7 擴增區(qū)

不能從本區(qū)再進入任何“上游”區(qū)域，可降低本區(qū)的氣壓以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。
為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的走動。如有加樣則應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。
打開預(yù)處理過的反應(yīng)混合液時必須防止液體濺出，尤其是在巢式擴增步驟之間。一個簡單的方法是在打開反應(yīng)管前快速離心數(shù)秒�！　�

完成操作及每天工作后都必須對實驗室臺面進行清潔和消毒，紫外照射方法與前面區(qū)域相同。如有溶液濺出，必須處理并作出記錄。

8擴增產(chǎn)物分析區(qū)

下述操作在本區(qū)內(nèi)進行：擴增片段的測定。
核酸擴增后產(chǎn)物的分析方法多種多樣（如，膜上或微孔板上探針雜交方法、瓊脂糖凝膠電泳等）
目前國內(nèi)的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法，PCR-ELISA方法，也有膜上探針雜交方法。
注：本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源，因此必須注意避免通過本區(qū)的物品及工作服將擴增產(chǎn)物帶出。　　

小結(jié)

嚴格按照實驗室清潔衛(wèi)生要求開展各類實驗，是保證實驗有效運行與實驗員安全工作的前提。要不斷完善實驗室衛(wèi)生管理體系，加強實驗員的安全意識，保護員工的人身安全，確保實驗室工作在清潔、安全、有序的條件下進行。