采用內標法定量時，內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說，內標物應當是一個能得到純樣的已知化合物，這樣它能以準確、已知的量加到樣品中去，它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征，最好是被分析物質的一個同系物。

當然，在色譜分析條件下，內標物必須能與樣品中各組分充分分離。需要指出的是，在少數情況下，分析人員可能比較關心化合物在一個復雜過程中所得到的回收率，此時，他可以使用一種在這種過程中很容易被完全回收的化合物作內標，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。

對于內標法定量分析來說，內標物的選擇必須滿足如下的條件：

1、內標物與被分析物質的物理化學性質要相似（如：沸點、極性、化學結構等）；

2、內標物應是該試樣中不存在的純物質；

3、它必須完全溶于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學反應；并與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；

4、能加入內標物的量應接近于被測組分；

5、色譜峰的位置應與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。且又不共溢出，目的是為了避免儀器的不穩定性所造成的靈敏度的差異；

6、選擇合適的內標物加入量，使得內標物和被分析物質二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應值區域而導致的靈敏度偏差。

需要指出的是，在少數情況下，分析人員可能比較關心化臺物在一個復雜過程中所得到的回收率，此時，可以使用在這過程中很容易被完全回收的化臺物作內標，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。

在用內標法做色譜定量分析時，先配制一定重量比的被測組分和內標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關系曲線，此曲線即為標準曲線。在實際樣品分析時所采用的色譜條件應盡可能與制作標準曲線時所用的條件一致，因此，在制作標準曲線時，不僅要注明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等)，還應注明進樣體積和內標物濃度。在制作內標標準曲線時，各點并不完全落在直線上，此時應求出面積比和重量比的比值與其平均位的標準偏差，在使用過程中應定期進行單點校正，若所得值與平均值的偏差小于2，曲線仍可使用，若大于2，則應重作曲線，如果曲線在鉸短時期內即產生變動，則不宜使用內標法定量。