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      [分享]培養(yǎng)基使用常見問題解答

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-05-09
      核心提示:1.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固,如何測定其pH?答:有專門的固體培養(yǎng)基pH計(jì)。2.滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測pH值?如何測定pH值
       1.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固,如何測定其pH?

      答:有專門的固體培養(yǎng)基pH計(jì)。

      2.滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測pH值?如何測定pH值?

      答:每個(gè)制備批次的培養(yǎng)基都應(yīng)測定pH,可采用pH試紙或pH計(jì)測量。

      3.稀釋液滅菌后pH值是否有變化?有何影響?(如pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液,pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液)

      答:一般pH有下降現(xiàn)象,約0.2左右,不同培養(yǎng)基pH變化可能不同。

      4. 孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進(jìn)行培養(yǎng)霉菌和酵母菌?

      答:根據(jù)中國藥典,采用玫瑰紅鈉瓊脂。

      5. 配制PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時(shí)有時(shí)因?yàn)楦邏簻缇鳒缇^程溫度過高而導(dǎo)致培養(yǎng)基混濁了,這種情況緩沖液還能用嗎?

      答:建議按正常溫度滅菌,混濁培養(yǎng)基建議不要使用。

      6.含瓊脂培養(yǎng)基在冷藏中形成冰晶怎么處理?銷毀還是加熱再用?

      答:建議不要使用。

      7.融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻?

      答:防止受熱不均引起結(jié)塊。

      8. 滅菌后,滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開,這段時(shí)間是否會(huì)造成過度滅菌。

      答:自然冷卻過程已經(jīng)計(jì)算在正常滅菌時(shí)間內(nèi)了,不會(huì)造成過度滅菌。

      9. 培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱滅菌,是否必須待干燥后才可以使用?若烘干或其它方法,中間過程怎樣防止微生物污染?

      答:如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實(shí)驗(yàn),不一定要烘干;否則,應(yīng)干燥后使用,滅菌及干燥盡量在同一鍋里進(jìn)行,或用紗布和牛皮紙包扎緊密。

      10. 培養(yǎng)基的避光儲(chǔ)存,是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲(chǔ)存?

      答:最好都避光保存。無條件時(shí),光敏感的培養(yǎng)基一定要。

      11. 商品培養(yǎng)基干粉說是加蒸餾水溶解,實(shí)際操作是否可以用純化水或注射用水?

      答:只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì)的水均可。

      12. 培養(yǎng)基及器具滅菌可否同一設(shè)備同滅菌時(shí)間進(jìn)行滅菌?

      答:最好分開滅菌,條件不允許時(shí)可同爐滅菌,前提是都是潔凈無污染的。

      13. 培養(yǎng)基的保溫能否用60℃的培養(yǎng)箱,它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同?

      答:可以用恒溫培養(yǎng)箱保溫,但保溫溫度一般是50℃左右,且時(shí)間不能過長,一般是不超過4小時(shí)。

      14. 培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于210℃冰箱內(nèi)?

      答:需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會(huì)寫明。

      15. 培養(yǎng)基滅菌后成份會(huì)有所蒸發(fā)減少,如何處理這個(gè)問題?

      答:正常情況下蒸發(fā)量較少,可忽略不計(jì)。

      16. 培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的?應(yīng)如何避免?

      答:可能的情況有 1. 培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定;2. 滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢;3. 培養(yǎng)基儲(chǔ)存不當(dāng);4. 融化時(shí)沸騰時(shí)間較長等。

      17. 準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基有效期如何驗(yàn)證?

      答:定期取出培養(yǎng)基驗(yàn)證其無菌性,促生長能力等方面。

      18. 培養(yǎng)基配制好滅菌后,在高壓容器中保溫降至50℃左右,可不可行?

      答:建議最好不要,避免過度受熱。

      19. 脫水培養(yǎng)基對(duì)濕度是否有要求?多少適宜?

      答:按要求室溫干燥環(huán)境儲(chǔ)存即可。

      20. 培養(yǎng)基pH值測定溫度在25℃,這個(gè)溫度應(yīng)怎么控制?比如固體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基使用過程中還能調(diào)節(jié)pH值嗎?

      答:可水浴控制培養(yǎng)基溫度。

      21. 配制培養(yǎng)基過程中,按說明書稱定量,加規(guī)定的純化水,煮沸溶解,為了避免煮沸過程總減少水分,是否要在配制過程適當(dāng)增加水?比如陪硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基.。

      答:可適量增加,自己掌握。

      22. 商品培養(yǎng)基一定要當(dāng)天配當(dāng)天用嗎?可否在一周內(nèi)用完?

      答:不是即配即用的培養(yǎng)基的話,儲(chǔ)存得當(dāng),可以使用。

      23. 稱量培養(yǎng)基時(shí),注意不要吸入粉末,這粉末是指何物?

      答:就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基 ,因?yàn)榕囵B(yǎng)基的粉末對(duì)呼吸道有刺激作用,而且培養(yǎng)基中的某些成分,如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等,長期吸入并在體內(nèi)累積到一定量會(huì)對(duì)人體健康有危害。所以培養(yǎng)基配制稱量需做好個(gè)人防護(hù),且最好選擇少粉塵環(huán)保型顆粒培養(yǎng)基。

      24. 煮培養(yǎng)基,用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行?硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸?如何煮沸?用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎?可不可以水浴煮沸呢?

      答:硫乙醇應(yīng)煮沸,量大時(shí),我實(shí)驗(yàn)室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸,因?yàn)樗≈蠓协傊酆茈y溶,導(dǎo)致瓊脂分裝不均勻,前段分裝的瓊脂含量少,后段分裝的瓊脂含量高,導(dǎo)致有的管或瓶中的凝固。

      25. 如培養(yǎng)基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎?

      答:高溫滅菌器有安全閥,溫度下降到安全閥可打開時(shí)將培養(yǎng)基取出室溫冷卻,各型號(hào)滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。

      編輯:songjiajie2010

       
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