一、洗滌

1、玻璃器皿的洗滌

1.1 浸泡

新瓶使用前應先用自來水簡單刷洗,然后用稀鹽酸溶液（5%）浸泡過夜；培養后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中；注意:讓水能完全進入瓶皿中,不應留有氣泡.

1.2 刷洗

浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗滌劑洗滌（宜選用軟毛刷和優質的洗滌劑,如高級洗衣粉或洗潔精）,絕對不能使用含沙粒的去污粉！洗刷時特別注意洗刷瓶角部位.

1.3 浸泡

器皿要充滿清潔液,勿留氣泡.浸泡時間不應少于6小時；一般應浸泡過夜.

清洗液配方:

【強液】    重鉻酸鉀     63g

           濃硫酸       1000ml

           蒸餾水       200L

【次強液】  重鉻酸鉀     120g

           濃硫酸       200ml

           蒸餾水       1000ml

【弱液】   重鉻酸鉀     100g

           濃硫酸       100ml

           蒸餾水       100ml

矽酸鈉洗液；

使用比較安全,可以代替清洗液,但價格較貴.

先配制成100Χ貯存液:矽酸鉀80g,偏磷酸鈉9g,加熱溶解在1000ml蒸餾水中.使用時,用蒸餾水100倍稀釋.

1.4 沖洗

刷洗和浸酸后都必須用水充分沖洗,使之不留任何殘跡.沖洗宜用洗滌裝置,以保證沖洗效果,如用手工操作,每瓶都得用水灌滿,倒掉,重復十次以上,最后再用蒸餾水漂洗2～3次,涼干備用.

 

2、膠塞的清洗

新購置的膠塞先用自來水沖洗干凈后,再做常規處理.

常規洗滌方法:

        浸泡

         ↓

2%NaOH煮沸（10～20分鐘）

         ↓

     自來水沖洗

         ↓

1%稀鹽酸浸泡（30分鐘）

         ↓

     自來水沖洗

         ↓

 蒸餾水清洗（2～3次）

         ↓

      晾干備用

 

3、塑料器皿的清洗

目前我國培養使用的塑料器皿主要是從國外購置的,是一種無毒并已經消毒過滅菌密封包裝的商品.用時,只要打開包裝即可,是一次使用性物品.必要時,用后經無菌處理后 ,尚可反復使用2～3次,但不宜過多.再用時仍然需要清洗和滅菌處理.塑料器皿質地軟,不宜用毛刷刷洗,造成清洗困難.為此使用中一是防止劃痕,二是用后要立即浸入水中,嚴防附著物干結；如殘留有附著物,可用脫脂棉清拭掉,用流水沖洗干凈,涼干、再用2%NaOH液浸泡過夜,用自來水充分沖洗,然后 用5%鹽酸溶液浸泡30分鐘,最后用自來水沖洗和蒸餾水漂洗干凈,涼干后備用.

 

二、消毒

1.紫外線消毒

紫外線直接照射法很方便,效果好,是目前各實驗室常用的消毒法.

【適用范圍】空氣、操作臺表面和一些不能使用其它方法進行消毒的培養器皿（如塑料培養皿、培養板等）

【要求】（1）培養室的紫外線燈應距地面2.5米,使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射,才能發生有效的消毒作用.（2）由于各種細菌對紫外線的敏感性不同,所用照射時間和劑量也不同.

【缺點】（1）產生臭氧,污染空氣,對身體有害；（2）射線照射不到的部位起不到消毒作用,故消毒時,物品不宜相互遮擋.

【注意】 有人習慣于邊照射邊進行實驗操作,這樣不好,一是紫外線對細胞、試劑和培養液都有不良影響,二是對人體皮膚也有傷害.

2.濕熱消毒

濕熱消毒即高壓蒸汽消毒,是最有效的一種方法.

【適用范圍】布類、膠塞、金屬器械、玻璃器皿及某些培養用液.

【要求】

培養用液、橡膠制品            10磅10分鐘

布類、玻璃制品、金屬器械等    15磅20分鐘

3.濾過消毒

【適用范圍】 大多數培養用液,如人工合成培養液、血清、酶溶液等（這些在高溫下會發生變性,失去其功能,必須采用濾過法除菌.

【常用濾器】 Zeiss濾器、微孔濾膜濾器及各種不同規格的一次性濾器.常用孔徑0.22um濾膜過濾一般用液即可.

【注意】 

（1）濾膜用后丟棄,濾器清洗也比較方便,先用毛刷蘸洗滌劑刷洗干凈,用自來水沖洗后,再用蒸餾水沖洗,涼干即可；

（2）用前再裝上一張新的濾膜；

（3）消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都用紙包裝好,以保證消毒時的效果；

（4）消毒后,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊；

（5）濾過少量液體時,用一種能安裝在注射器上的小濾器,使用相同的濾膜,濾過時把濾過物裝入注射器針管內,壓出過濾物注入無菌容器中即.