先將液體石蠟滅菌，然后放于37℃恒溫箱中，使水汽蒸發掉備用。再將需要保存的菌種在最適宜的斜面培養基中培養，用無菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟，注入已長好的斜面培養基上，用量以高出斜面頂端1cm為準。試管需直立，置4℃或室溫下保存，一般無芽胞細菌可保存1年左右。

2、高層半固體瓊脂石蠟保存法

將需保存的菌種經平板劃線分離后，挑單個菌落用接種針反復穿刺接種到高層半固體瓊脂培養基中，經37℃12小時培養后取出，用無菌操作將滅菌的液體石蠟滴加半固體瓊脂菌種管表層約0.5cm高度，存放4℃冰箱，1年轉種1次。

3、蒸餾水保存法

取滅菌蒸餾水6-7ml加于試管斜面上，用吸管研磨，洗下菌苔充分混勻，將此菌液分裝于滅菌的螺旋小瓶中，或用膠塞密封，置4℃保存可存活數年。