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      免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):分泌型IgA的分離與

      放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-27

      (一)材料與試劑

      1.初乳

      2.SephadexG200

      3.0.10Mol/L pH6.8PB液

      4.0.01Mol/L pH7.4PB液

      5.DEAE52

      (二)操作方法

      1.取初乳20ml,10 000rpm離心10min,棄去表面脂肪層及底部的沉淀物。

      2.取乳清過SephadexG200柱(柱規格為2.50cm×90cm),以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脫,第一峰為IgA(含IgG)。

      3. 收集乳液,于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。

      4. 將透析液濃縮至5mg/ml以上。

      5. 過DE52層析柱,用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脫,洗下蛋白峰為IgG,棄去。

      6. 換用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS(0.10Mol/L NaCl)液洗脫,

      收集洗脫液 ,即為較純的IgA液。

      7. 必要時,可再過一次SephadexG200柱。

      8. 濃縮,鑒定


       
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