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      高通量細胞篩選技術(high throughput cell-based screening tech

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

      高通量細胞篩選技術(high2throughput cell-based screening technology) 是以高通量方式研究基因功能最有效的方法之一。通常,基因功能的初步篩選在96 孔或384 孔板上進行,通過基因轉染將候選基因導入細胞,或直接將基因表達產物加入細胞培養(yǎng)液中。篩選測定方法基于要研究的生物學或醫(yī)學問題,例如,要研究抗血管生成活性,選用內皮細胞進行細胞生長、分化、遷移和粘附等分析測定;研究免疫調節(jié)活性,可選擇淋巴細胞或造血細胞進行細胞生長和分化的分析測定;研究神經營養(yǎng)因子活性,可選用神經細胞進行細胞存活、突起生長測定。除上述與細胞表型或形態(tài)學相關的檢測指標外,細胞信號轉導通路、糖代謝、能量產生和代謝產物分析(metabolic control analysis) 等代謝通路也是基因功能重要的研究內容。

        結合抗體芯片技術、多路測定技術(multiplexing) 等新的檢測方法[12~14 ] ,高通量細胞篩選的應用更為廣泛。另外,隨著熒光成像讀板儀(fluorescence image plate reader ,FLIPR) 、定量PCR、高通量熒光激活細胞分類器(HT2FACS) 等檢測方法和技術的不斷發(fā)展和應用,靈敏度和重現性這兩個高通量細胞篩選的關鍵問題也逐步得以解決。

      初篩得到的基因通常選用二級分析模型進行功能驗證,驗證方法可能通量略低,但與功能的相關性更強。


       
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