在色譜儀分析檢測過程中，分配系數(shù)和容量因子一定程度上展現(xiàn)色譜柱的柱效，了解影響色譜柱分離度的因素，有助于有效地使用和保養(yǎng)色譜柱，提高色譜柱分離度和色譜儀檢測靈敏度。
分配系數(shù)是指在一定溫度下，待測樣品在兩相間達到分配平衡時，在固定相與流動相中的濃度之比。分配系數(shù)與組分、流動相和固定相的溫度、壓力有關(guān)。在液相色譜儀中，固定相確定后，分配系數(shù)主要受流動相的性質(zhì)影響。在試驗中主要靠調(diào)整流動相的組成配比及pH值，以獲得組分間的分配系數(shù)差異及適宜的保留時間，達到分離的目的。
在流動相、固定相、溫度和壓力一定條件下，樣品濃度很低時，分配系數(shù)只取決于組分的性質(zhì)，而與濃度無關(guān)。在大多情況下，分配系數(shù)隨著濃度的增大而減小，這時色譜峰為拖尾峰；而有時隨著溶質(zhì)濃度增大，分配系數(shù)也增大，這時色譜峰為前延峰。因此，只有盡可能減少進樣量，使組分在柱內(nèi)濃度降低，分配系數(shù)恒定時，才能獲得正常峰。在同一色譜條件下，樣品中分配系數(shù)值大的組分在固定相中滯留時間長，后流出色譜柱；分配系數(shù)值小的組分則滯留時間短，先流出色譜柱。混合物中各組分的分配系數(shù)相差越大，越容易分離，因此混合物中各組分的分配系數(shù)不同是色譜分離的前提。分配系數(shù)K和分配比k的關(guān)系：K=k·ββ為相比率，是反映各種色譜柱柱形特點的又一個參數(shù)，β=Vm/Vs，Vm為流動相的體積，即死時間(t0)與流動相流速的乘積，Vs為色譜柱中固定相的體積。對填充柱其β值一般為6~35，對毛細管其β值為60~600。容量因子是待測樣品在兩相間達到分配平衡時，在固定相與流動相中的量之比。因此容量因子也稱質(zhì)量分配系數(shù)。容量因子的物理意義：表示一個組分在固定相中停留的時間是不保留組分保留時間的倍數(shù)。分配系數(shù)為0時，化合物全部存在于流動相中，在固定相中不保留，停留的時間為0；分配系數(shù)越大，說明固定相對此組分的容量越大，出柱慢，保留時間越長。分配系數(shù)K，容量因子k與保留時間之間有如下關(guān)系：k=t'R/t0，t'R=tR-t0上式說明容量因子的物理意義:表示一個組分在固定相中停留的時間(t'R)是不保留組分保留時間(t0)的幾倍。k=0時，化合物全部存在于流動相中，在固定相中不保留，t'R=0；k越大，說明固定相對此組分的容量越大，出柱慢，保留時間越長。容量因子與分配系數(shù)的不同點是：k取決于組分、流動相、固定相的性質(zhì)及溫度，而與體積Vs、Vm無關(guān);K除了與性質(zhì)及溫度有關(guān)外，還與Vs、Vm有關(guān)。由于t'R、t0較Vs、Vm易于測定，所以容量因子比分配系數(shù)應(yīng)用更廣泛。
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發(fā)布日期：2022-02-10
